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      抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒法檢測研討
      點擊次數:1255 更新時間:2018-01-25

      抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒基因現已整合到銀耳基因組中;RT-PCR成果顯現,在銀耳細胞中可以動物ELISA試劑盒檢測到人胰島素基因的mRNA;Southern雜交成果表明人胰島素基因以單復制的方式整合到銀耳基因組DNA中。本試驗經過設置農桿菌與銀耳芽孢不同共培育時刻、誘導劑乙酰丁香酮的濃度、銀耳芽孢及農桿菌ELISA試劑盒濃度等要素對轉化功率影響,成果在乙酰丁香酮濃度為500μmol/mL、銀耳芽孢濃度為108個/mL、農桿菌OD=0.5及共培育時刻為2d時,轉化功率zui高,為310個轉化子/108個銀耳芽孢。轉化子轉接5代后對潮霉素仍有抗性,說明外源基因在銀耳芽孢中可以不亂遺傳。在試驗室已開始樹立的農桿菌EHA105介導銀耳轉基因辦法的基礎上。
      ELISA試劑盒以銀菌株Tr21-01為動身菌株,經過凍融法將帶著有潮霉素磷酸轉移酶(Hph)基因為遺傳符號及人胰島動物ELISA試劑盒素基因(BAC)為意圖基因的質粒pBHg-BCA導入根癌農桿菌GV3101,LBA4404和AGL-1中,并進一步介導轉究。試驗結L-1具有較高的轉化率;GV3101轉化率較低,且假陽性較高;LBA4404無抗性菌落長出。此成果表明不同的農桿菌侵染銀耳芽孢才能具有差異性,且對受體侵染具有一定的特異性。本試驗以農桿菌EHA105為參照菌株,抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒對農桿菌AGL-1介導轉化銀耳進行研究。基于農桿菌介導轉基因受許多要素的影響,本試驗從農桿菌與銀耳芽孢共培育時刻、銀耳芽孢濃度、農桿菌濃度、誘導劑乙酰丁香酮(AS)的濃度、轉率等方面進行優化。ELISA試劑盒其轉化條件優化成果為:AGL-1菌液OD值為0.4~0.5,AS誘導培育濃度為250μg/mL、共培育濃度為150μ耳芽孢濃度為10~8/mL,共培育72h轉化率zui高,可達500個/10~8,且陽性菌落為89%;EHA105菌液OD值為0.4~0.5。
       LIX1IgG    小鼠血管緊張素原(aGT)
       Lpin1 IgG    小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ) 
       Lpin1 IgG    小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)
       L-型電壓依賴型鈣通道αIgG    小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)
       L-型電壓依賴型鈣通道βIgG    小鼠血管活性腸肽(VIP)
       L型鈣通道蛋白a1亞型3體IgG    小鼠溴脫氧核苷(BrdU) 
       L型鈣通道蛋白a1亞型6IgG    小鼠雄烯二酮(ASD)
       L型鈣通道蛋白IgG    小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)
       L選擇素IgG    小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)
       L-脫羧酶IgG    小鼠心鈉肽(ANP)
      抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

       

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