PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

　　引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

　　①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

　?、谝飻U增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

　?、垡飰A基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。PCR檢測試劑盒

　?、鼙苊庖飪炔砍霈F二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

　?、菀?'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

　　⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

　?、咭锏奶禺愋裕阂飸c核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

　　引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。PCR檢測試劑盒