細胞簡介：

脾是重要的器官，有造血、濾血、衰老血細胞及參與反應等功能。也是細胞遷移和接受抗原刺激后發生應到、產生效應分子的重要場所。

脾由被膜、小梁、白髓、紅髓、邊緣區幾部分組成。其中，小梁間的網狀組織結構則形成了脾組織的細微支架。小梁內的平滑肌細胞可以通過舒張或伸縮調節脾的含血量。

細胞特性：

1） 細胞來源于人正常脾臟組織。

2) 細胞鑒定：α-SMA熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5) 細胞生長方式：長梭形細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 平滑肌細胞培養基 作為體外培養的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)檢測試劑盒 ，英文名： Bid ELISA Kit

Mouse bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)檢測試劑盒

Mousehiston-H2bELISAKit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforhumahyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit人甲狀腺刺激免疫球蛋白

通用型亞鹽比色法定量檢測試劑盒

ELISAKitCG大鼠絨毛膜

HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

rSLT/SLT-IIe(O139 0.2mgrSLT/SLT-IIe(O139) 重組豬水腫素蛋白

IL17RA重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His 標簽) Protein

GMFG Protein Human 重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 (His 標簽)

IGFBP3 Protein Human 重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 標簽)

rSLT/SLT-IIe(O139 0.2mgrSLT/SLT-IIe(O139) 重組豬水腫素蛋白

GMFG Protein Human 重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 (His 標簽)

HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

IGFBP3 Protein Human 重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 標簽)

IL17RA重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠白介素15(IL-15)ELISA 試劑盒

Rat glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 大鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒

Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)檢測試劑盒 進口分裝

HumanCaspase12,Casp-12檢測試劑盒人胱天蛋白酶12(Casp-12)檢測試劑盒

轉基因棉花MON15985品系試劑盒20次

Humansmallbreastepithelialmucin,SBEMELISAKit人小表皮粘蛋白(SBEM)檢測試劑盒

人脾小梁平滑肌細胞兔子肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子端粒酶(TE)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子凋亡信號調節激酶I(ASK-1)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。