細(xì)胞簡(jiǎn)介：

在嚴(yán)重創(chuàng)傷應(yīng)激急性期，邊緣系統(tǒng)為應(yīng)激應(yīng)答敏感區(qū)，其功能和應(yīng)激聯(lián)系密切，杏仁核是邊緣系統(tǒng)中重要的皮質(zhì)下核團(tuán)，在創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙發(fā)病中起重要作用。

海馬是由于海馬神經(jīng)元凋亡，致體積減小，杏仁核和海馬的功能密切相關(guān)，海馬的部分功能可由杏仁核的調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)。

神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長(zhǎng)突起，由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。

細(xì)胞特性：

1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腦組織。 本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。

2） 細(xì)胞鑒定：β-tubulin熒光染色為陽性。

3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素5(IL-5)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL-5 ELISA Kit

Mouse ierleukin 1 soluble receptor II (IL-1sR II) ELISA Kit 小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠糖化血紅蛋白(mouse HbA1c)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforiNOS(Mouseinducibleniicoxidesyhase)ELISAKit小鼠誘導(dǎo)型合成酶

通用型副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定性試劑盒20次

ELISAKitapo-A1大鼠載脂蛋白A1

TSLP重組小鼠 TSLP 蛋白 Protein

Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白 Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白 Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

TSLP重組小鼠 TSLP 蛋白 Protein

MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein

小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat Granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測(cè)試劑盒

HumanGTPaseactivatingprotein,GAPELISAKit 人GTP酶活化蛋白(GAP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-lymphocyteglobulin,ALG檢測(cè)試劑盒人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISAKit人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞小鼠白介素-2(mouse IL-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠可溶性白介素-2受體(mouse sIL-2R)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-3(mouse IL-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-4(mouse IL-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。