注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

需要而未提供的試劑和器材：
1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等。 

標本的采集與保存：
1、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即
可，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。
2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，
取上清即可檢測，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。
3、組織勻漿：
1） 取適量組織塊，于預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；
2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復凍融法可重復2 次）。
3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測。
4、其它生物標本：請1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。
操作步驟：
夾心法，一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體;
加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結;
洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進行鍵結;
洗去多余未鍵結一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結;
洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結果;
間接法，一般的操作步驟為：
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。
加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。
洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測的一次抗體鍵結。
洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器測定塑膠盤中的吸光值，以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。
競爭法，其操作步驟為：
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體
加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結，由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限，因此當檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結，即所謂競爭法之由來。

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人25羥基325(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 96T

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