細胞簡介：

腎是脊椎動物的一種器官，屬于泌尿系統的一部分，負責過濾血液中的雜質、維持體液和電解質的平衡，后產生尿液經尿道排出體外；同時也具備的功能以調節血壓。

周細胞是一種包圍全身和靜脈中內皮細胞的細胞，可以收縮。周細胞產生手指狀的外延以調控的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細胞連接，包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常腎組織。

2)細胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規則細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 DELF原代周細胞培養體系 作為該細胞的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品：

BrdU標記法細胞繁殖比色法定量檢測試劑盒

小鼠神經調節素4(NRG4)elisa檢測試劑盒

大鼠S轉移酶(GSTs)elisa分析檢測試劑盒

組織基質金屬（MMP-7）活性熒光定量檢測試劑盒

人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa分析檢測試劑盒

山羊甲狀腺素(T4)elisa檢測試劑盒免費代測

乳品三聚氰胺快速顯色定性檢測試劑盒（家用型/工業型）

活體細胞線粒體膜通道孔（MPTP）紅色熒光（TMRM）檢測試劑盒

大鼠脂多糖（LPS）elisa檢測試劑盒

味覺2受體成員13抗體 T2R13

細胞骨架結合蛋白2抗體 TWF2

Src家族相關磷酸化蛋白2抗體 SCAP2

TRIM38蛋白抗體 TRIM38

AF680標記的山羊抗人乙肝表面抗原抗體 HBsAg, Alexa Fluor 680 conjugated

AF750標記的抑制肌原調節蛋白1抗體 MDFI, Alexa Fluor 750 conjugated

緊密連接蛋白23抗體 Claudin 23

卷曲螺旋結構域蛋白124抗體 CCDC124

原鈣粘蛋白γA11抗體 PCDHGA11

粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體 MUC2

分泌型卷曲相關蛋白1抗體 SFRP1

富含脯蛋白12抗體 PRR12

G蛋白偶聯受體γ14抗體 G gamma14

HRP標記的核纖層蛋白A抗體 Lamin A/C, HRP conjugated

II)重鏈抗體 Thrombin heavy chain

趨化因子受體1重組兔單克隆抗體 CX3CR1

人blca-4 elisa檢測試劑盒

絲蛋白酶抑制劑B3抗體  Anti-SERPINB3

PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM

Mouse Anti-Rabbit IgM / PE-Cy5.5

小鼠腎周細胞唾液酸結合性球蛋白樣凝集素14抗體