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      產(chǎn)品名稱:番鴨細小病毒LAMP試劑盒

      產(chǎn)品特點:番鴨細小病毒LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:4-氟-2,6-二羥硝:4- two hydroxy nitrobenzene -2,6-:87987

      3--2--4(3H)喹唑:237.263- amino -2- phenyl -4 (3H):1904-60-5 C14H11N3O

      3-(4-溴)吡唑:3- (4-):73387-46-9 C9H7BrN2

      產(chǎn)品型號:50次

      更新日期:2021-02-20

      訪問次數(shù):1090

      50次番鴨細小病毒LAMP試劑盒的詳細資料:

      參數(shù)規(guī)格:

      產(chǎn)品名稱

      番鴨細小病毒LAMP試劑盒

      英文名稱

       Lamp kit for Muscovy Duck Parvovirus

      規(guī)格

      50次

      儲存條件:
      僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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      使用方法:
      一、樣品 DNA 的制備
      用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
      二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
      1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
      2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
      3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
      4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
      5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
      6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
      7. NC 管中不加任何陽性對照。
      8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 
      檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

      4-氟-2,6-二羥硝:4- two hydroxy nitrobenzene -2,6-:87987

      3--2--4(3H)喹唑:237.263- amino -2- phenyl -4 (3H):1904-60-5 C14H11N3O

      3-(4-溴)吡唑:3- (4-):73387-46-9 C9H7BrN2

      丁二Succinate:118.09 C4H6O4:110-15-6

      丙:120.19Cumene:103-65-1

      3-乙酰-2-溴吡:200.033- acetyl -2-:84199-61-1 C7H6BrNO

      丹參酮IIA磺鈉Sodium sulfonate IIA::

      亮甲酚藍Brilliant cresyl blue:332.83 C17H21ClN4O:10127-36-3

      三七皂甙R1Three seven saponin R1:933.131C47H80O18:80418-24-2

      番鴨細小病毒LAMP試劑盒 CLEC3B / Tetranectin ELISA配對抗體

      IL18 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

      小鼠LCN2 / NGAL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      MMP-2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

      重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

      小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 EIF4EBP1 基因全長ORF克隆

      PAPPA2 / Pappalysin 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      KPNA1 基因全長ORF克隆

      IFNL3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       

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