產(chǎn)品名稱：人肺癌成纖維細(xì)胞

英文名稱：Human Pulmonary Cancer Fibroblast Cells

組織來源：肺癌

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人肺癌成纖維分離自肺癌組織；肺癌是常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮，故亦稱支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴(kuò)散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長快，對人群健康和生命威脅大的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報(bào)道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的位，女性發(fā)病率占位，死亡率占位。肺癌的病因至今尚不明確，大量資料表明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。肺癌，其實(shí)不是一種病，而是幾十種病的組合，有多種亞型，多種特性；根據(jù)肺癌細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)特點(diǎn)，可以初步分為兩種類型：小細(xì)胞肺癌(SCLC)15%和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)85%。這兩種類型肺癌的生長特點(diǎn)、擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)和治療方案均不相同。絕大多數(shù)肺癌是非小細(xì)胞肺癌，約占85%。它又能進(jìn)一步被分為三類，分別是：腺癌，鱗癌和大細(xì)胞癌。其中腺癌是主要的類型，約占非小細(xì)胞肺癌中的50%。如果是不吸煙的女性患者，幾乎全部都是腺癌。人肺癌成纖維是肺癌組織中的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞，癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer associated fibroblast，CAF)在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視。該細(xì)胞通過與癌細(xì)胞的直接接觸、分泌多種因子以及對腫瘤基質(zhì)的改造，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移甚至耐藥性的發(fā)生。隨著研究的深入，有人提出CAF可能成為抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)。然而CAF的分化來源多樣，相應(yīng)的形態(tài)和功能各異，因此深入了解CAF的分化來源有利于更全面地認(rèn)識(shí)腫瘤發(fā)展的機(jī)制，為臨床治療提供理論依據(jù)，體外培養(yǎng)肺癌成纖維細(xì)胞對肺癌研究有重要意義。

實(shí)驗(yàn)室分離的人肺癌成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的人肺癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人肺癌成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒

People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)檢測試劑盒

RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C

血清脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20次

Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit豬白介素3(IL-3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein

CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白

CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白

F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠(Pepsin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phospholipase C gamma chain (PLC 1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)檢測試劑盒

HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交換體3(NHE3)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenIerleukin2,IL-2檢測試劑盒雞白介素2(IL-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞HISTONEH3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit小鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人肺癌成纖維細(xì)胞小鼠仙臺(tái)病毒（Sendai）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠細(xì)小病毒（CPV）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝