① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：兔肺血管平滑肌細胞

英文名稱：Rabbit Pulmonary Vascular Smooth Muscle Cells

組織來源：肺

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔肺血管平滑肌分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應；②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發展及穩定性有關。

實驗室分離的兔肺血管平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔肺血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔肺血管平滑肌體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

大鼠B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)檢測試劑盒 ，英文名： LAB7-2 ELISA Kit

Human ula sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 人超敏C反應蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒

Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 綿羊主要組織相容性復合體(MHC)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforC4b(HumanComplemefragme4b)ELISAKit人補體片斷4b

細菌凍存培養基100毫升

rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒規格：96T/48T

PGF重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 Protein

谷脫羧酶2(GAD2)重組蛋白 Recombinant Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2)

CCL27重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 Protein

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

其他哺乳動物

L選擇素(SELL)重組蛋白 Recombinant Selectin, Leukocyte (SELL)

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

PDCD1LG2重組小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 Protein

ACVRL1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標簽)

PNLIPRP2重組人 Galactolipase / PNLIPRP2 蛋白 Protein

豚鼠雌激素(esogen)檢測試劑盒 ，英文名： esogen ELISA Kit

Human epidermal growth factor (PTN) ELISA Kit 人多效生長因子(PTN)檢測試劑盒

rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-glucosidase(MouseBeta-glucosidase)ELISAKit小鼠β葡糖苷酶

細菌纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

RabbithighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒規格：96T/48T

兔肺血管平滑肌細胞人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HNP1-3 (Neuophil Peptide 1-3) ELISA Kit

人中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human NAP3 (Neuophil Activating Protein 3) ELISA Kit

人中性粒細胞堿性0酸酶(NAP)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human NAP (Neuophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit

人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用